1. Quali sono le differenze tra le cellule di procarioti e di eucarioti?
2. Quele e' il ceppo di batteri piu' nelle tecniche di ingegneria genetica
3. Descrivere un plasmide per trasformazioni di batteri
4. Descrivere un plasmide per produzione di proteine in batteri
5. Quale e' la differenza tra una libreria genomica ed una a DNA complementare.
6. Come si possono trasformare i batteri con un plasmide?
7. Quali sono i promotori batterici inducibili?
8. Cosa e' il fago lambda?
9. Quali differenze ci sono tra la crescita litica e lisogena del fago lambda?
10. Cosa sono i siti attB e attP nel fago lambda?
11. Descrivere struttura ed utilizzo del promotore del gene Lac?
12. Cosa e' e come viene utilizzato il gene LacZ?
13. Cosa e' e come viene utilizzato il gene LacI?
14. Cosa e' un sito operatore in un promotore batterico?
15. Descrivere le funzioni del promotore PL.
16. Descrivere la produzione dell'ormone Insulina per la produzione di un farmaco utilizzando il sistema batterico.
17. Quale significato ha la sigla "ampR"
18. Utilizzo degli antibiotici beta-lattamici come marcatori selettivi in batteri.
19. Cosa e' il peptidoglicano?
20. Quali sono le funzioni della beta-lattamasi?
21. Cosa e' un trasposone batterico?
22. Ruolo della Dialanilalanina nella sintesi della parete cellulare batterica
23. Marker selettivo della tetraciclina/kanamicina: meccanismo di azione
24. Come avviene e cosa serve la trans-peptidizzazione?
25. RNA polimerasi batterica: struttura e funzione
26. Meccanismo di azione del fattore sigma
27. Il pBR322 e successive modificazioni
28. Middle log phase: importanza nella crescita batterica.
29. Quando una coltura batterica si dice saturata?
30. Mantenimento di ceppi di batteri trasformati
31. Descrivere la differenza tra "siti cos" ed "estremita' cos"
32. Circolarizzazione del fago, duplicazione e formazione del concatenamero del fago lambda: descrivere
33. Cosa serve un fago "helper"
34. Ruolo delle Proteina D e Proteina E nella maturazione del fago.
35. Cosa e' il "capside" di un fago?
36. Descrivere utilizzo e funzioni del "cosmide"
37. Metodi di screening di una libreria genomica
40. Cosa vuol dire "ori" nella mappa di un  plasmide
41. Quale e' il sito di attacco del ribosoma per l'inizio della traduzione nei batteri?
42. Come si puo' stimare il numero di cellule per ml in una sospensione batterica?
43. Utilizzo di SP6, T7 e T3
44. Differenze tra lieviti e batteri
45. Descrivere la cellula di lieviti
46. Clonaggio in cellule di lieviti, quali i vantaggi rispetto alle cellule batteriche
47. Marcatori selettivi per le cellule di lieviti
48. Cosa significa "selezione per auxotrofia"
49. Promotori inducibili per l'espressione di proteine eterologhe in lieviti
50. Il lievito Saccharomyces cerevisiae
51. Maturazione dell'RNA nei lieviti
52. Controllo della trascrizione nei lieviti
53. Duplicazione di cellule di lieviti
54. Cosa sono i geni TRP1, URA3, LEU2, HYS3
55. Trasformazione dei lieviti con il metodo del litio acetato
56. Trasformazione dei lieviti con il metodo degli sferoplasti
57. Descrivere le origini di replicazione ARS e 2micron
58. Descrivere un plasmide per la trasformazione di lieviti
59. Struttura e funzione del minicromosoma (YAC)
60. Perche' e' necessario inserire i telomeri nel minicromosoma?
61. Ruolo del Centromero (CEN) nel minicromosoma
62. Quando si preferisce utilizzare un minicromosoma e quando un vettore plasmidico?
63. Cosa vuol dire vettore episomiale?
64. Descrivere il Mating type A ed Alpha nei lieviti
65. Cosa e' un ceppo eterotallico
66. Locus HTM nella conversione di Mating type
67. Chimere basate sull'ubiquitina per impedire l'eterogeneita' N-terminale di un aproteina espressa in lieviti
68. Il promotore della metallotioneina CUP1
69. Cosa sono le "UAS" a monte del TATA box nei promotori di lievito
70. Descrivere il "sistema dei due ibridi" nei lieviti
71. La distruzione genica nei lieviti
72. Quale ruolo hanno giocato i lieviti nello studio del ciclo cellulare?
73. Cosa e' lo START nel ciclo di lieviti?
74. Gemmazione nella duplicazione cellulare
75. Controllo della conversione da uno stato aploide ad uno diploide e viceversa nei lieviti
76. Utilizzo di Gal4 nei lieviti.
77. Cosa sono e cosa servono i ceppi Cir+ (differenza con i ceppi Cir°)
78. Colture di cellule di eucarioti: principi generali
79. Modalita' di tripsinizzazione delle cellule in coltura
80. Cosa e' il punto di restrizione nel ciclo cellulare delle cellule di eucarioti superiori?
81. Cosa si intende per fase G0?
82. Quale e' la differenza tra la fase G1 e la fase G2?
83. Ruolo dell'MPF nella progressione tra la fase G2 e la fase M
84. Descrivere l'interazione tra ciclina B e la cdc2.
85. Quale e' il ruolo della cdc25 nell'attivazione del complesso CiclinaB/cdc2?
86. Cosa sono Wee1 e Myt1
87. Quali cicline sono state identificate e come si modificano durante la progressione del ciclo cellulare?
88. Quale e' il partner preferito della Ciclina D?
89. Che funzione ha la proteina del Retinoblastoma?
90. Descrivere il processo di attivazione di E2F
91. Perche' p53 e' un gene soppressore del tumore?
92. Cosa e' e che ruolo ha PCNA durante la trasnsizione G1/S?
93. Cosa sono le proteine INK4 ?
94. Cosa sono le proteine della classe CIP/KIP ?
95. Cosa si intende per CKI ?
96. Ruolo del sistema dell'ubiquitina/proteasoma sul controllo della progressione del ciclo cellulare
97. Perche' il ciclo cellulare e' Unidirezionale?
98. Cosa succede ad una cellula che ha subito un danno al suo DNA durante la fase G1
99. Descrivere i punti di controllo del ciclo cellulare
100. Cosa succede ad una cellula se durante la mitosi i sui cromosomi non si trovano allineati sul fuso mitotico?
101. Cosa si intende per iniziazione/progressione tumorale?
102. Cosa si intende per angiogenesi?
103. Quando una cellula tumorale genera una metastasi ?
104. Descrivere le differenze tra un tumore benigno ed un tumore maligno
105. Quali geni possono essere spesso mutati in una cellula tumorale?
106. Cosa e' un  proto-oncogene?
107. Descrivere le differenze morfologiche visibili tra una cellula normale ed una tumorale.
108. Descrivere il meccanismo di azione di un ormone lipofilo
109. Cosa e' la superfamiglia dei recettori nucleari ?
110. Cosa e' uno Zinc finger?
111. Cosa sono gli elementi responsivi agli estrogeni?
112. Cosa si intende per sequenza palindroma?
113. Quale sono le differenze tra l'azione di un ormone lipofilo ed uno idrofilico?
114. Descrivere un recettore a sette domini transmembrana
115. Cosa sono le G proteins?
116. che tipo di attivita' possono esercitare le subunita' alfa delle G-proteins?
117. Cosa e' l'Adenilciclasi?
118. Ruolo del cAMP nella trasmissione del segnale
119. Cosa serve la Protein Chinasi A?
120. Ruolo della Fosfodiesterasi nel controllo dei livelli intracellulari di AMP ciclico
121. Cosa e' e da chi viene attivata la proteina CREB?
122. Cosa e' un cAMP responsive element?
123. Cosa e' il sito AP1?
124. Ruolo del complesso Jun/Fos nella trascrizione genica
125. Il complesso Fos/Fos e' attivo?
126. Cosa e' e come si origina il diacilglicerolo?
127. Perche' i livelli intracitoplasmatici di calcio sono molto piu' bassi di quelli del reticolo endoplasmatico?
128. Ruolo del citocromo C nell'attivazione dell'apoptosi
129. Descrivere l'apoptosoma.
130. Cosa sono e come vengono attivate le caspasi?
131. Cosa sono i recettori di morte?
132. Funzioni della Caspasi 8
133. Ruolo di Bcl2 nell'apoptosi
134. Azione delle HSP nella prevenzione dell'attivazione dell'apoptosi
135. Perche' durante l'apoptosi il DNA si frammenta?
136. Descrivere le variazioni morfologiche di una cellula che va in apoptosi.
137. Ruolo dell'apoptosi nell'embriogenesi
138. Descrivere il meccanismo di azione di un fattore di crescita della classe dell'EGF
139. Funzioni dei recettori tirosino-chinasici
140. Cosa e' un dominio SH2?
141. Cosa e' un dominio SH3?
142. Sapreste descrivere il ruolo della proteinma SOS nella trasmissione del segnale intracellulare?
143. Cosa e' la proteina RAS e perche' viene definita un proto-oncogene?
144. Descrivere il sistema delle MAP chinasi
145. La proteina IRS nella trasmissione del segnale.
146. Struttura e biosintesi del recettore dell'IGF.
147. Come si puo' rendere immortale una cellula?
148. Il virus SV40
149. Cosa e' l'antigene T grande
150. Origine di replicazione maggiormente utilizzata nei vettori plasmidici per trasfezioni di cellule di eucarioti superiori
151. Espressione di proteine in cellule di eucarioti: quali promotori utilizzereste?
152. Descrivere la Tumorigenesi diretta
153. Formazione di ibridomi per l'immortalizzazione di cellule
154. Differenze tra una cellula TOTIPOTENTE ed una cellula MULTIPOTENTE
155. Cellule staminali da animali adulti: e' possibile la transdifferenziazione?
156. Meccanismo di differenziamento delle Cellule staminali neuronali
157. Metodi di trasfezione cellulare
158. Perche' alcuni virus possono indurre una trasformazione tumorale?
159. Marcatori selettivi per l'ottenimento di linee cellulari stabilmente trasfettate
160. Differenze tra cellule trasfettate in modo temporaneo ed in modo stabile.
161. Vettori plasmidici per lo studio dell'espressione genica.
162. Descrivere i geni reporter maggiormente utilizzati per misurare l'attivita' trascrizionale
163. Delezioni multiple per l'analisi di elementi responsivi nei promotori di geni eucariotici
164. Vettori di espressione per proteine eucariotiche in cellule in coltura
165. Cosa e' la Green Flourescent Protein?
166. Come e' possibilie visualizzare la disribuzione intracellulare di una proteina in cellule vive?
167. Cosa e' la tecnica FRAP?
168. Descrivere il sistema TetOn TetOff e le possiblili applicazioni
169. Come si puo' tentare di studiare un gene apoptotico o una proteina citotossica in trasfezioni cellulari stabili?
170. Cosa sono le integrine?
171. Ruolo della fibronectina nell'adesione cellulare.
172. Cenni dei meccanismi di migrazione cellulare
173. Come possono interagire tra loro le cellule contigue di un tessuto?

Domande sulle esercitazioni di laboratorio

174. Quali sono le proncipali differenze tra cappe sterili a flosso verticale ed a flusso orizzontale ?
175. Quali apparecchiature sono indispensabili in una camera sterile ?
176. Cosa serve la tripsina nelle tecniche di coltura cellulare ?
177. Quali sono le contaminazioni piu' frequenti nell'utilizzo di colture cellulari di cellule di eucarioti ?
178. E' possibile recuperare delle cellule contaminate da batteri ?
179. Quali caratteristiche devono possedere i medium di coltura per cellule di eucarioti ?
180. Cosa serve il Siero fetale bovino (FBS) nel medium per colture cellulri di eucarioti ?
181. Descrivere la procedura della tripsinizzazione.
182. Quando e' necessario tripsinizzare delle cellule ?
183. Come avviene la conta cellulare ?
184. Come si conservano le cellule eucariotiche ?
185. Procedure di autoclavatura
186. Cosa si intende per colture "confluenti"
187. Cosa si intende per coltura in monostrato ?
188. Cosa si intende per colture cellulari primarie ?
189. Cosa si intende per colture cellulari stabilizzate ?
190. Cosa si intende per colture cellulari immortalizzate ?
191. Cosa si intende per colture cellulari tumorali ?
192. Cosa significa senescenza per le colture cellulari stabilizzate ?
193. Descrivere il test di sopravvivenza cellulare dell'MTT e quando si puo' utilizzare questa metodica
194. Che correlazione esiste tra differenziamento e proliferazione cellulare ?
195. Cosa e' un microscopio rovesciato ? in cosa si differenzia dalla microscopia classica ?
196. Cosa serve il Contrasto di Fase in microscopia ?
197. Che caratteristiche hanno le cellule in coltura a morfologia tondeggiante con bordi molto rifrangenti e luminosi ?
198. Cosa e' la microscopia a fluorscenza ?
199. Come descrivereste una contaminazione di lieviti in cellule in coltura ?
200. Come descrivereste una contaminazione di muffe in cellule in coltura ?

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