NOZIONI GENERALI SULLE TRASFEZIONI
influenzano enormemente le capacita' di trasfezione di un vettore plasmidico in una cellula coltivata in piastra:
TIPI DI CELLULE E SPECIE (uomo o altri mammiferi).
- Non tutti i tipi di cellule:
. possono essere trasfettate con efficienza
. producono le stesse modificazioni post-traduzionali
TIPO DI ESPERIMENTO:
- localizzazione per immunocitochimica --> trasfezione transiente
- produzione di proteina da purificare --> trasfezione stabile
DIMENSIONI DEL GENE DA ESPRIMERE IN CELLULE
- limitato dalle dimensioni del plasmide
CONTROLLO DELL'ESPRESSIONE GENICA
- promotore costitutivo nel vettore